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明膠酶譜試劑盒操作注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2020-08-25      瀏覽次數(shù):1095

明膠酶譜試劑盒操作注意事項(xiàng)

1.制備聚丙烯酰胺時(shí)應(yīng)注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應(yīng)嚴(yán)格準(zhǔn)確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PH在7.5-7.6,復(fù)性的TRITON時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)有絮狀物,所以實(shí)驗(yàn)時(shí)盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因?yàn)闀?huì)改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

6、組織或者細(xì)胞的話可以用PBS,可以用低滲溶液如三分之一或者四分之一的生理鹽水按照5倍體積加入后震蕩裂解細(xì)胞,離心即可,步驟和提蛋白很相似即可,其實(shí)重點(diǎn)的步驟主要是采用低滲裂解液進(jìn)行裂解,組織的話可以勻漿20-30次,然后10000轉(zhuǎn)左右離心,5分鐘取上清即可

 

明膠酶譜試劑盒操作注意事項(xiàng)

 

 

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