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HEPES溶液(0.5mol/L) 應(yīng)該如何使用

更新時(shí)間:2022-04-20      瀏覽次數(shù):1637

 HEPES溶液(0.5mol/L) 應(yīng)該如何使用


上海信帆生物供應(yīng)的 HEPES溶液,規(guī)格有100ml和500ml,濃度多樣,PH也有很多,滿足不同客戶的不同實(shí)驗(yàn)。


詳情如下:

HEPES溶液(0.5mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)100ml
HEPES溶液(0.5mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)500ml
HEPES溶液(0.5mol/L,Free   Acid)100ml
HEPES溶液(0.5mol/L,pH6.8-8.0)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)500ml
HEPES溶液(1mol/L,Free   Acid)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0)100ml
HEPES-BSA溶液(HA溶液)100ml
HEPES-BSA溶液(HACM溶液,含鈣鎂)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH7.0)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH7.2)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH7.4)100ml
HEPES溶液(1mol/L,pH7.5)100ml
HEPES粉劑(1mol/L,Free   Acid)100ml
HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,pH6.7)100ml
HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,7.05)100ml
HEPES緩沖液(1×,含鈣鎂)500ml
HEPES緩沖液(10×,含鈣鎂)500ml
HEPES緩沖液(1×HCMF,無鈣鎂)500ml
HEPES緩沖液(10×HCMF,無鈣鎂)500ml
HEPES緩沖液(1×HMF,無鎂)500ml
HEPES緩沖液(10×HMF,無鎂)500ml




在細(xì)胞培養(yǎng) 過程中,經(jīng)常少不了HEPES緩沖液。那么,HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?HEPES緩沖液是一種弱勢,在開放式的培養(yǎng)條件中,若加入HEPES,可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高,從而將PH維持在7.0左右。

HEPES分子 量為238.31,化學(xué)名:,分子式: C8H18N2O4S。

HEPES常用于生物緩沖劑,pH值緩沖范圍:6.8-8.2,用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取 試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對細(xì)胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑,能較長時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。

關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制,不同的文獻(xiàn)資料有不同的說法。根據(jù)用途,一種是單純的HEPES+NaOH,另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下:

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。

二、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液調(diào)節(jié)pH值,最后定容。

三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制

將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水,用0.5M NaOH調(diào)節(jié)至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。

HEPES使用方法有兩種:

(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10 mmol/L。

(2)亦可配成 100 x 貯存液(l mol/L),使用前取 99ml培養(yǎng)液加入 lml貯存液,最終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES貯存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中,用lN NaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。

需要注意的是,HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L,對細(xì)胞無毒性作用。一般情況下,濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力。現(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶,大家根據(jù)實(shí)際情況正確靈活配制就OK了


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