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ELISA實(shí)驗(yàn)操作過程中:溫育的溫度和方式有哪些

更新時間:2015-07-03      瀏覽次數(shù):1502

ELISA實(shí)驗(yàn)操作過程中:溫育的溫度和方式有哪些以及注意事項(xiàng),上海信帆生物給你全面的解答。

溫育的溫度:育常采用的溫度有43 、37℃、室溫或4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的溫育溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的zui適反應(yīng)溫度。抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2 h 產(chǎn)物的生成可達(dá),為加速反應(yīng),可在一定范圍內(nèi)提高反應(yīng)的溫度并在反應(yīng)過程中連續(xù)振蕩來增加抗原抗體接觸的概率。抗原抗體反應(yīng)在4℃更為*,形成的產(chǎn)物更多、更穩(wěn)定,但因所需時間太長,在ELISA檢測中一般不予采用。
溫育的方式:溫育方式常采用溫箱法、微波輻射法和水浴法。其中水浴法能較好解決因受熱不均衡所致的周圍孔與中央孔結(jié)果的吸光度差異(即“邊緣效應(yīng)")。可將ELISA板置于水浴箱中,板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡,為避免蒸發(fā),可用塑料貼封紙覆蓋板孔。若用溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料(如金屬等),在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。溫育過程中每塊反應(yīng)板不能重疊放置,防止溫度擴(kuò)散的不均勻性。

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