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ST2單克隆 包被抗體

目前使用抗體的實驗方法有很多，不同的使用方法過程中，因為對蛋白樣品的處理方式不一樣，蛋白的含量有差異，對抗體的識別表位和效價要求都是不一樣的。具體的根據(jù)說明書注明的產(chǎn)品應(yīng)用方法進(jìn)行選擇。如果針對具體的實驗方法沒有找到合適的抗體的，可以結(jié)合蛋白序列分析和抗體的抗原信息，選擇盡可能有效果的抗體。

 一般基于實驗操作的實驗方法不會使用帶有標(biāo)記的一抗，比如 WB、IHC 等，都是通過二抗類的試劑標(biāo)記達(dá)到結(jié)果呈現(xiàn)的目的。但是基于儀器分析的一些實驗，可能就會使用到直接標(biāo)記的一抗，比如流式實驗。那么需要了解到自己將要使用的儀器能檢測到的熒光范圍，針對不通的參數(shù)要求選擇對應(yīng)的標(biāo)記物。在免疫熒光雙標(biāo)實驗中，需要選配不同的熒光標(biāo)記物。有人認(rèn)為單抗比多抗好，其實這并不是一個嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠^點，只能說在可能性上單抗的特異性更好一些，而多抗的親和力會優(yōu)于單抗，并且特異性并不一定就遜于單抗，主要看抗原的設(shè)計水平。目前商品化抗體里單抗主要是鼠單抗、兔單抗，多抗主要是兔多抗、山羊多抗等，其他種屬來源抗體較少。不建議糾結(jié)于單抗好還是多抗好，能做出實驗的抗體就是好抗體。

在選擇上一般建議實驗種屬和抗體種屬親緣性越遠(yuǎn)越好，不宜同源?？贵w不同種屬會要影響接下來二抗的選配。特別是在免疫熒光雙標(biāo)實驗中，需要在區(qū)別于實驗種屬的基礎(chǔ)上，區(qū)分開兩個指標(biāo)的抗體種屬來源，以便于二抗區(qū)別識別。

抗體選擇與使用過程中，多少還會遇到一些意想不到的事情。有些細(xì)節(jié)，還是需要多注意一些。如在選擇做阻斷或中和實驗時，有時需要將抗體加到細(xì)胞培養(yǎng)液中，這是需要注意抗體是否含有疊氮鈉。如果是大包裝的抗體，進(jìn)行分裝是比較節(jié)約的方式，如果是高效價的，可以配成母液再分裝?？贵w的短時間運(yùn)輸，用普通冰塊保持溫度是可以滿足要求的。

另外不要糾結(jié)于 WB 過程中分子量的問題。很多時候，我們看到同樣的抗體，不同的品牌，甚至同一品牌不同的貨號，標(biāo)注的分子量都不一樣。其實可能只是生物試劑商只檢測時使用了不同的種屬不同的樣品類型，或是參照了不同的文獻(xiàn)，對使用者來說，同樣的樣品，不管使用哪個品牌的，只要抗體是對的，目的條帶只會出現(xiàn)在相同的位置。關(guān)于分子量的問題，一般不建議看產(chǎn)品說明，WB 中條帶的位置由樣品決定，并不會因為抗體不同而不同。所以在檢測蛋白之前，我們可以通過數(shù)據(jù)庫或參考文獻(xiàn)，對將要檢測的蛋白做個比較全面的了解，包括其可能剪切與修飾的情況、表型的情況等。在第一次使用一個新的抗體時，不要根據(jù)分子量橫向剪膜，可以保留幾個全泳道，看看條帶位置或分布的情況。

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