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油紅O染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)實(shí)驗(yàn)樣本類型:冰凍切片/細(xì)胞主要用途:觀察組織內(nèi)脂肪的含量和定位信帆生物提供各類實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù),更多服務(wù)項(xiàng)目歡迎致電咨詢,我們將竭誠為您服務(wù)!
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油紅O染色簡介:
油紅O對(duì)脂滴的染色機(jī)制一般認(rèn)為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質(zhì)染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時(shí),油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時(shí)油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。
油紅O染色步驟(僅供參考):
1、 固定:將冰凍切片復(fù)溫干燥10min;細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,5min/次。
2、 染色:入油紅O工作液孵育10-15min;細(xì)胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,5min/次,入油紅O工作液37°染色1-2h。
3、 分化:75%酒精分化2s,水洗1min。
4、 復(fù)染細(xì)胞核:Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍(lán),流水沖洗。
5、 封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。
染色結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。
1、油紅O是對(duì)脂類物質(zhì)進(jìn)行染色,石蠟切片在處理過程中脂類物質(zhì)無法保存,所以石蠟切片不能進(jìn)行油紅O染色。
2、油紅O染液使用一段時(shí)間后,染出的脂滴顏色會(huì)偏黃,此時(shí)就需要更換染液。
3、油紅染色時(shí),動(dòng)作要輕,因?yàn)橹我滓莆唬⑶以诜馄瑫r(shí)應(yīng)避免蓋玻片滑動(dòng);
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